Anticuerpos policlonales contra la proteína recombinante NS3 del virus del dengue

Liliana Morales, Myriam L. Velandia, María Angélica Calderon, Jaime E. Castellanos, Jacqueline Chaparro-Olaya, .

Palabras clave: virus del dengue, proteínas recombinantes, inmunoprecipitación, producción de anticuerpos, Western blotting

Resumen

Introducción. El dengue es una enfermedad causada por uno de los cuatro serotipos del virus del dengue (DENV) y es endémica en, aproximadamente, 130 países. Su incidencia ha aumentado notablemente en las últimas décadas, así como la frecuencia y la magnitud de los brotes. A pesar de los esfuerzos, no existen tratamientos profilácticos ni terapéuticos contra la enfermedad y, en ese contexto, el estudio de los procesos que gobiernan el ciclo de infección del DENV es esencial para
desarrollar vacunas o terapias antivirales. Una de las moléculas del DENV más prometedoras es la proteína no estructural 3 (NS3), la cual es indispensable para la replicación viral y es uno de los principales blancos inmunológicos durante la infección.
Objetivo. Producir anticuerpos policlonales para contribuir a los futuros estudios sobre las interacciones entre la proteína NS3 y otras proteínas celulares.
Materiales y métodos. Se expresaron dos proteínas recombinantes del dominio helicasa de NS3 del DENV de serotipo 2, las cuales se emplearon para inmunizar ratas y producir anticuerpos policlonales.
Resultados. Los anticuerpos producidos fueron útiles en ensayos de Western blot e inmunofluorescencia y se reportó por primera vez un anticuerpo policlonal anti-NS3 que permitió la inmunoprecipitación de la proteína viral y la detecta con Western blot sin necesidad de inducir sobreexpresión de NS3 o de usar extractos de células marcados metabólicamente con radioisótopos.
Conclusión. Las proteínas recombinantes expresadas y los anticuerpos producidos constituyen herramientas valiosas para estudiar procesos infecciosos del DENV que involucren a la proteína NS3 y evaluar pruebas dirigidas a interferir las funciones de esta proteína.

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  • Liliana Morales Instituto de Biología Molecular, Laboratorio de Parasitología Molecular, Universidad El Bosque, Bogotá, D.C., Colombia
  • Myriam L. Velandia Instituto de Virología, Universidad El Bosque, Bogotá, D.C., Colombia
  • María Angélica Calderon Instituto de Virología, Universidad El Bosque, Bogotá, D.C., Colombia
  • Jaime E. Castellanos Instituto de Virología, Universidad El Bosque, Bogotá, D.C., Colombia
  • Jacqueline Chaparro-Olaya Instituto de Biología Molecular, Laboratorio de Parasitología Molecular, Universidad El Bosque, Bogotá, D.C., Colombia

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Cómo citar
1.
Morales L, Velandia ML, Calderon MA, Castellanos JE, Chaparro-Olaya J. Anticuerpos policlonales contra la proteína recombinante NS3 del virus del dengue. biomedica [Internet]. 24 de enero de 2017 [citado 18 de marzo de 2024];37(1):131-40. Disponible en: https://revistabiomedica.org/index.php/biomedica/article/view/3249
Publicado
2017-01-24
Sección
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