Resumen del taller sobre el uso de la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) para distinguir entre Trypanosoma cruzi y tripanosoma rangeli

David Campbell, Clara Isabel González, Carlos Jaramillo, Marleny Montilla, Winston Rojas, Luz Angela Labrada, William López, Diego Mejía, Yaneth Osorio, Cecilia Santrich, .

Resumen

Este taller se realizó con el propósito de transferir la tecnología de la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) para la detección de T. cruzi y T. rangeli a laboratorios en Colombia involucrados en el diagnóstico y estudios epidemiológicos de la enfermedad de Chagas. Para demostración de la técnica se utilizaron muestras clínicas y epidemiológicas de áreas endémicas colombianas. En los ensayos se emplearon muestras de tripanosomas provenientes de diferentes medios de cultivo para evaluar el posible efecto de los componentes de estos medios sobre la sensibilidad del PCR. Se hizo extracción de ADN utilizando los métodos de ebullición, lisis hipotónica y geneclean. El ADN se amplificó utilizando oligonucleótidos sintéticos, correspondientes a una secuencia conservada de 22 nucleótidos dentro de un gen mini-exón. Los dos organismos fueron distinguidos por las movilidades electroforéticas de sus respectivos productos de amplificación, confirmando su identidad con sondas intergénicas específicas de especie, marcadas con digoxigenina dUTP. La hibridación se visualizó con la reacción de color del NBT. De un total de 28 muestras analizadas, se lograron 17 identificaciones que coincidieron con la clasificación original. De cinco muestras desconocidas, tres fueron identificadas como T. rangeli y dos como infecciones mixtas. Se presentaron resultados ambiguos en dos muestras, ocasionados por contaminación en el PCR. Solamente dos muestras no se pudieron identificar mediante PCR por problemas en la extracción del ADN de la muestra. Teniendo en cuenta estos resultados preliminares se abre la posibilidad de utilizar esta técnica como una herramienta útil o método adicional a las técnicas de rutina para detectar y diagnosticar la enfermedad de Chagas en Colombia.

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  • David Campbell Universidad de California
    Departamento de Microbiología e Inmunología. Universidad de Caifornia. Los Angeles, Caifornia
  • Clara Isabel González Universidad Industrial de Santander

    Universidad Industrial de Santander. Bucaramanga. Santander

  • Carlos Jaramillo Universidad de los Andes

    Universidad de los Andes. Laboratorio de Microbiología y Parasitología Santafe de Bogotá.

  • Marleny Montilla Instituto Nacional de Salud

    Instituto Nacional de Salud Grupo de Parasitología Santafe de Bogotá.

  • Winston Rojas Universidad de Antioquia

    Universidad de Antioquia, Departamento de Biología. Medellín, Antioquia

  • Luz Angela Labrada Fundación Centro Internacional de Entrenamiento e lnvestigaciones Medicas
    Fundación Centro Internacional de Entrenamiento e lnvestigaciones Medicas - CIDEIM, Cali
  • William López Fundación Centro Internacional de Entrenamiento e lnvestigaciones Medicas
    Fundación Centro Internacional de Entrenamiento e lnvestigaciones Medicas - CIDEIM, Cali
  • Diego Mejía Fundación Centro Internacional de Entrenamiento e lnvestigaciones Medicas
    Fundación Centro Internacional de Entrenamiento e lnvestigaciones Medicas - CIDEIM, Cali
  • Yaneth Osorio Fundación Centro Internacional de Entrenamiento e lnvestigaciones Medicas
    Fundación Centro Internacional de Entrenamiento e lnvestigaciones Medicas - CIDEIM, Cali
  • Cecilia Santrich Fundación Centro Internacional de Entrenamiento e lnvestigaciones Medicas
    Fundación Centro Internacional de Entrenamiento e lnvestigaciones Medicas - CIDEIM, Cali
Cómo citar
Campbell, D., González, C. I., Jaramillo, C., Montilla, M., Rojas, W., Labrada, L. A., López, W., Mejía, D., Osorio, Y., & Santrich, C. (1). Resumen del taller sobre el uso de la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) para distinguir entre Trypanosoma cruzi y tripanosoma rangeli. Biomédica, 13(2), 94-101. https://doi.org/10.7705/biomedica.v13i2.2051

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Memoranda