Obtención de una sonda para cuantificar el mARN del factor activador de la transcripción STAT5 en rata

Blanca L. Ortíz, Myriam Sánchez de Gómez, Gunnar Norstedt, .

Resumen

Se describe la estrategia empleada para clonar, en un vector de expresión, un fragmento del gen de STAT5 amplificado por la técnica de PCR. Variando la concentración de magnesio y la temperatura de alineación, se logró amplificar el fragmento deseado a partir de un cADN de STAT5b de ratón. El producto de PCR se clonó y se comprobó la identidad de la sonda mediante análisis de restricción y secuenciación. Esta sonda se usó en el ensayo de protección con ribonucleasa A o hibridización en solución, para cuantificar el mARN de STAT5 en hígado y linfocitos de timo de ratas hembras. Se encontró una mayor expresión del mARN de STAT5 en hígado.

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  • Blanca L. Ortíz Departamento de Química, Facultad de Ciencias, Universidad Nacional de Colombia, Santa Fe de Bogotá.
  • Myriam Sánchez de Gómez Departamento de Química, Facultad de Ciencias, Universidad Nacional de Colombia, Santa Fe de Bogotá
  • Gunnar Norstedt Departamento de Medicina Molecular, Instituto Karolinska, Estocolmo
Cómo citar
Ortíz, B. L., Sánchez de Gómez, M., & Norstedt, G. (1998). Obtención de una sonda para cuantificar el mARN del factor activador de la transcripción STAT5 en rata. Biomédica, 18(3), 185-91. https://doi.org/10.7705/biomedica.v18i3.989
Publicado
1998-09-01
Sección
Artículos originales