Obtención de una sonda para cuantificar el mARN del factor activador de la transcripción STAT5 en rata

  • Blanca L. Ortíz Departamento de Química, Facultad de Ciencias, Universidad Nacional de Colombia, Santa Fe de Bogotá.
  • Myriam Sánchez de Gómez Departamento de Química, Facultad de Ciencias, Universidad Nacional de Colombia, Santa Fe de Bogotá
  • Gunnar Norstedt Departamento de Medicina Molecular, Instituto Karolinska, Estocolmo

Resumen

Se describe la estrategia empleada para clonar, en un vector de expresión, un fragmento del gen de STAT5 amplificado por la técnica de PCR. Variando la concentración de magnesio y la temperatura de alineación, se logró amplificar el fragmento deseado a partir de un cADN de STAT5b de ratón. El producto de PCR se clonó y se comprobó la identidad de la sonda mediante análisis de restricción y secuenciación. Esta sonda se usó en el ensayo de protección con ribonucleasa A o hibridización en solución, para cuantificar el mARN de STAT5 en hígado y linfocitos de timo de ratas hembras. Se encontró una mayor expresión del mARN de STAT5 en hígado.

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Publicado
1998-09-01
Cómo citar
Ortíz, B. L., Sánchez de Gómez, M., & Norstedt, G. (1998). Obtención de una sonda para cuantificar el mARN del factor activador de la transcripción STAT5 en rata. Biomédica, 18(3), 185-91. https://doi.org/10.7705/biomedica.v18i3.989
Sección
Artículos originales