@article{Guerra_Calvo_Wasserman_Chaparro-Olaya_2016, title={Producción de proteínas recombinantes de Plasmodium falciparum en Escherichia coli}, volume={36}, url={https://revistabiomedica.org/index.php/biomedica/article/view/3011}, DOI={10.7705/biomedica.v36i3.3011}, abstractNote={<p><strong>Introducción.</strong> La producción de proteínas recombinantes es fundamental para el estudio funcional de las proteínas de <em>Plasmodium falciparum</em>. Sin embargo, las proteínas recombinantes de P. falciparum están entre las más difíciles de expresar y, cuando lo hacen, usualmente se agregan dentro de cuerpos de inclusión insolubles.<br /><strong>Objetivo.</strong> Evaluar la producción de cuatro proteínas de <em>P. falciparum</em> usando como sistema de expresión dos cepas de <em>Escherichia coli</em> genéticamente modificadas para favorecer la producción de proteínas heterólogas y establecer una reserva de proteínas recombinantes puras y solubles, y producir anticuerpos policlonales a partir de ellas.<br /><strong>Materiales y métodos.</strong> Las proteínas recombinantes, las cuales correspondían a secuencias parciales de PfMyoA (Miosina-A) y PfGAP50 (proteína-asociada a glideosoma de 50 kDa) y a las secuencias completas de PfMTIP (proteína de interacción con miosina-A) y PfGAP45 (proteína asociada a glideosoma de 45 kDa), fueron expresadas como proteínas de fusión con la glutatión S-transferasa y luego purificadas y usadas para producir anticuerpos policlonales en ratón.<br /><strong>Resultados.</strong> La expresión de las proteínas recombinantes fue mucho más eficiente en la cepa BL21-CodonPlus (la cual expresa tRNAs escasos en las bacterias silvestres), que en la cepa BL21-pG-KJE8. Por el contrario, aunque la cepa BL21-pG-KJE sobreexpresa chaperonas, no redujo la formación de cuerpos de inclusión.<br /><strong>Conclusión.</strong> El uso de cepas de<em> E. coli</em> genéticamente modificadas fue fundamental para alcanzar altos niveles de expresión de las cuatro proteínas recombinantes evaluadas y permitió obtener dos de ellas en forma soluble. La estrategia utilizada permitió expresar cuatro proteínas recombinantes de <em>P. falciparum</em> en cantidad suficiente para inmunizar ratones y producir anticuerpos policlonales y, además, conservar proteína pura y soluble de dos de ellas para ensayos futuros.</p>}, number={Sup1}, journal={Biomédica}, author={Guerra, Ángela Patricia and Calvo, Eliana Patricia and Wasserman, Moisés and Chaparro-Olaya, Jacqueline}, year={2016}, month={abr.}, pages={97–108} }